Порошкообразная среда MEM α (минимальная необходимая среда α)

MEM α можно использовать с различными суспензионными и прикрепленными клетками млекопитающих, включая кератиноциты, первичные астроциты крысы и клетки меланомы человека. MEM α также доступен в версии без нуклеозидов и может использоваться в качестве среды для селекции DG44 и других DHFR-отрицательных клеток. Этот продукт изготовлен из сбалансированных солей Earle. MEM alpha не содержит белков, липидов или факторов роста. Следовательно, MEM α требует добавки, обычно 10% эмбриональной телячьей сыворотки (FBS). В MEM α используется буферная система с бикарбонатом натрия (2.2 г/л), поэтому для поддержания физиологического pH требуется среда с содержанием 5–10 % CO2. Для широкого спектра применений в клеточных культурах мы предлагаем модифицированные среды MEM α с различными составами, а также среды MEM α с индивидуальными составами.

Ингредиенты порошкообразной среды MEM α

Эта среда для культивирования клеток в виде сухого порошка MEM α содержит добавки бикарбоната натрия, регулировку pH и фильтрацию. Подробная схема приготовления выглядит следующим образом:

1. Добавьте 950 мл дистиллированной воды в сосуд для смешивания как можно ближе к конечному объему.
2. Добавьте сухую среду к воде комнатной температуры (от 15°C до 30°C) и осторожно перемешайте. Не нагревайте воду.
3. Промойте внутреннюю часть упаковки, чтобы удалить остатки порошка.
4. Добавьте в среду 29.3 мл раствора NaHCO75 с концентрацией 3 г/л.
5. Отрегулируйте pH на 0.2–0.3 единицы ниже желаемого конечного рабочего pH, медленно добавляя и перемешивая 1 н. NaOH или 1 н. HCl. После фильтрации pH может повышаться на 0.1–0.3 единицы. Рекомендуемый рабочий рН 7.1-7.4.
6. Отрегулируйте окончательный объем дистиллированной водой.
7. Немедленно обработайте среду через функцию мембранной фильтрации 0.2 мкм фильтра в стерильный контейнер, используя систему положительного давления.