Порошок M199 Medium

M199 особенно подходит для культивирования нетрансформированных клеток, а также широко используется в вирусологии, производстве вакцин и культивировании in vitro первичных эксплантатов эпителиальных клеток поджелудочной железы крысы и ткани хрусталика мыши. По сравнению с другими базальными средами М199 содержит уникальные компоненты, включая аденин, аденозин, гипоксантин, тимин и другие витамины. M199 имеет две сбалансированные солевые композиции, солевая композиция Эрла обычно используется в среде с CO2, солевая композиция Хэнка используется в среде без CO2. Среда 199 не содержит белков, липидов или факторов роста. В среде 199 используется буферная система с бикарбонатом натрия (2.2 г/л), поэтому для поддержания физиологического pH требуется среда с содержанием 5–10 % CO2. Для широкого спектра применений клеточных культур мы предлагаем модифицированные среды M199 с различными компонентами, а также среды M199 с настраиваемыми компонентами.

Ингредиенты порошкообразного M199 Medium

Эта среда для культивирования клеток в виде сухого порошка M199 должна быть дополнена бикарбонатом натрия, скорректирована по pH и отфильтрована во время приготовления. Подробная схема приготовления выглядит следующим образом:

1. Добавьте 950 мл дистиллированной воды в сосуд для смешивания как можно ближе к конечному объему.
2. Добавьте сухую среду к воде комнатной температуры (от 15°C до 30°C) и осторожно перемешайте. Не нагревайте воду.
3. Промойте внутреннюю часть упаковки, чтобы удалить остатки порошка.
4. Добавьте в среду 29.3 мл раствора NaHCO75 с концентрацией 3 г/л.
5. Отрегулируйте pH на 0.2–0.3 единицы ниже желаемого конечного рабочего pH, медленно добавляя и перемешивая 1 н. NaOH или 1 н. HCl. После фильтрации pH может повышаться на 0.1–0.3 единицы. Рекомендуемый рабочий рН 7.1-7.4.
6. Отрегулируйте окончательный объем дистиллированной водой.
7. Немедленно обработайте среду через функцию мембранной фильтрации 0.2 мкм фильтра в стерильный контейнер, используя систему положительного давления.