Порошкообразная культуральная среда DMEM F-12

Среда DMEM/F12 основана на среде DMEM с добавлением более богатых питательных веществ в среду F12, содержащую различные микроэлементы, и широко используется при культивировании различных клеток млекопитающих. В то же время среда DMEM/F12 часто используется в качестве основы для разработки бессывороточной среды, а также подходит для культивирования клеток млекопитающих и культивирования плотности колоний при низком содержании сыворотки. :12 смесь DMEM и Ham's F-1, содержащая высокую концентрацию глюкозы, аминокислот и витаминов DMEM с различными компонентами F-1. DMEM/F-12 не содержит белков, липидов или факторов роста. Таким образом, DMEM/F-12 может потребовать пищевых добавок, обычно 12% эмбриональной телячьей сыворотки (FBS). В DMEM/F-12 используется буферная система с бикарбонатом натрия, поэтому для поддержания физиологического pH требуется среда с содержанием 10–12 % CO5.

Для широкого спектра применений клеточных культур мы предлагаем модифицированную среду DMEM/F-12 с различными компонентами, а также среду DMEM/F-12 с настраиваемыми компонентами.

Состав порошкообразной культуральной среды DMEM F-12

Эта среда для культивирования клеток в виде сухого порошка DMEM/F-12 должна быть дополнена бикарбонатом натрия, скорректирована по pH и отфильтрована во время приготовления. Подробная формулировка выглядит следующим образом:

Эта среда для культивирования клеток в виде сухого порошка DMEM/F-12 должна быть дополнена бикарбонатом натрия, скорректирована по pH и отфильтрована во время приготовления. Подробная формулировка выглядит следующим образом:

1. Добавьте 950 мл дистиллированной воды в сосуд для смешивания как можно ближе к конечному объему.
2. Добавьте сухую порошкообразную среду в воду комнатной температуры (от 15°C до 30°C) и осторожно перемешайте. Не нагревайте воду.
3. Промойте внутреннюю часть упаковки, чтобы удалить остатки порошка.
4. Добавьте 50 мл раствора NaHCO75 с концентрацией 3 г/л в культуральную среду.
5. Отрегулируйте pH на 0.2–0.3 единицы ниже желаемого конечного рабочего pH, медленно добавляя и перемешивая 1 н. NaOH или 1 н. HCl. После фильтрации pH может повышаться на 0.1–0.3 единицы. Рекомендуемый рабочий рН 7.0-7.4.
6. Используйте дистиллированную воду, чтобы отрегулировать окончательный объем.
7. Немедленно обработайте культуральную среду через фильтрующую мембрану 0.2 мкм в стерильные контейнеры, используя систему фильтрации под положительным давлением.