RPMI 1640 Medium (Мемориальный институт Розуэлл-Парк)

Культуральная среда Rpmi-1640 изначально была специально разработана для культивирования лимфоцитов и в настоящее время широко используется для культивирования различных нормальных и раковых клеток, включая клетки HeLa, клетки Jurkat, клетки McF-7, клетки PC12, клетки РВМС, астроциты и раковые клетки. клетки. Это одно из наиболее широко используемых средств массовой информации. Уникальный эффект среды RPMI RPMI 1640 по сравнению с другими средами обусловлен тем, что она содержит восстанавливающий агент глутатион и высокую концентрацию витаминов. Культуральная среда RPMI 1640 содержит биотин, витамин B12 и ПАБК, которых нет в MEM Игла и DMEM.

Ингредиенты RPMI 1640 Medium

L-глютамин (глютамин)

L-глютамин (глютамин) является важным питательным элементом в клеточной культуре, но он нестабилен в растворе и самопроизвольно разлагается. Количество L-глютамина можно произвольно регулировать в соответствии с потребностями исследования среды без L-глютамина, а добавление свежего L-глютамина или его заменителей во время использования более полезно для роста клеток.

L-аланил-L-глутамин (Ala-Glu), также известный как аланил-глутамин и аланил-глутамилдипептид, представляет собой передовую добавку для культивирования клеток, которая может напрямую заменить L-глутамин в среде для культивирования клеток. L-глютамин является важным питательным веществом в клеточной культуре, но он нестабилен в растворе и будет, однако, нестабилен в растворе и спонтанно разлагается с образованием аммиака и пироглутаминовой кислоты, из которых аммиак вреден для клеток, тогда как L-аланил- L-глютамин очень стабилен в водном растворе и самопроизвольно не разлагается. Механизм утилизации клеток заключается в том, что во время культивирования клетки постепенно высвобождают пептидазу в культуральную среду для гидролиза L-аланил-L-глутамила в L-аланин и L-глутамин, а затем клетки поглощают и утилизируют эти два гидролиза. товары. Процесс клеточного использования L-аланил-L-глутамила подобен стратегии культивирования с добавлением потока в том, что низкие уровни L-глутамина постоянно добавляются в культуральную среду, тем самым увеличивая использование L-глутамина без образования избытка. аммиак, который способствует росту клеток. L-аланил-L-глутамил может заменить эквимолярный L-глутамин, подходит для всех клеток, требует небольшой адаптации и может увеличить время культивирования клеток. Это также может увеличить время культивирования клеток и уменьшить количество пассажей, что экономит время и деньги. Клетки, культивированные в среде с добавлением L-глутамина, показали более медленное снижение активности, чем клетки, культивированные в среде с добавлением L-глутамина. Несколько более длительный период задержки обусловлен временем, необходимым для высвобождения пептидазы и переваривания дипептида.

NEAA (заменимые аминокислоты)

NEAA (заменимые аминокислоты), которые представляют собой 7 NEAA из L-аланина, L-глутаминовой кислоты, L-аспарагина, L-аспарагиновой кислоты, L-пролина, L-серина и глицина, добавленные в среду MEM, могут уменьшить побочные эффекты. эффекты собственного производства клетками заменимых аминокислот во время культивирования клеток и эффективно способствуют клеточной пролиферации и метаболизму.

Глюкозу можно регулировать по желанию в соответствии с потребностями исследования, что удобно и быстро. Среда с высоким содержанием сахара обычно используется для быстрорастущих клеток с низкой адгезией, миеломных клеток гибридомы, клональных клеток, трансформированных клеток трансфекции ДНК, различных первичных вирусных клеток-хозяев, культуры одиночных клеток и производства вакцин, таких как использование Клетки СНО для экспрессии ЭПО и производства вакцины против гепатита В. Среда с низким содержанием сахара больше подходит для культивирования медленно метаболизирующихся адгезивно-зависимых клеток.

HEPES — отличный биологический буфер, не оказывающий токсического действия на клетки. Среда с HEPES может поддерживать постоянный диапазон pH в течение более длительного периода времени, что может эффективно предотвратить неблагоприятное влияние на рост клеток больших колебаний pH культуральной среды. Его можно использовать в инкубаторах без CO2.

Феноловый красный используется в качестве индикатора pH в культуральной среде для постоянного контроля pH культуральной среды. Феноловый красный делает культуральную среду желтой при низком рН, пурпурной при более высоком рН и красной при рН 7.2–7.4, что наиболее подходит для культивирования клеток. Однако феноловый красный имеет и некоторые недостатки. Исследования показали, что феноловый красный может имитировать эффекты стероидных гормонов (особенно эстрогена), поэтому при использовании чувствительных к эстрогену клеток (таких как ткань молочной железы) лучше всего использовать среду без фенолового красного. Феноловый красный может мешать обнаружению во время проточного цитометрического анализа. Кроме того, присутствие фенолового красного в некоторых составах сред без сыворотки может нарушать баланс натрия и калия.

Пенициллин-стрептомицин раствор

Смесь пенициллина и стрептомицина, также обычно называемая «двойными антибиотиками», является наиболее часто используемым антибиотиком в культурах in vitro для предотвращения микробного загрязнения, при котором пенициллин препятствует синтезу клеточной стенки бактерий и особенно эффективен против грамположительных бактерий, в то время как стрептомицин ингибирует синтез бактериального белка путем связывания с 30S-субъединицей бактериальной рибосомы и особенно эффективен против стрептомицина. но особенно эффективен против грамотрицательных бактерий. Комбинация пенициллина и стрептомицина может предотвратить большую часть бактериального заражения.

Этот продукт содержит аминокислоты, витамины, неорганические соли и многие другие компоненты, необходимые для мультикультивирования клеток, но не содержит белков, липидов или каких-либо факторов роста, поэтому продукт следует использовать с добавками сыворотки или бессывороточными добавками.

Предостережения

Этот продукт был отфильтрован и обеззаражен, и его следует использовать с осторожностью в асептических условиях во избежание загрязнения.
Не замораживайте и не размораживайте продукт, чтобы обеспечить его наилучшее использование.
Этот продукт предназначен только для научных исследований или дальнейшего изучения, а не для диагностики или лечения.